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          丁基疏水色譜柱其使用是很有講究的

          更新時間:2024-04-19瀏覽:940次
            丁基疏水色譜柱是一款以粒徑為2.5um的,丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質為填充劑的疏水作用色譜柱。適用于蛋白質、單抗、酶等生物大分子的分離分析。由于和藥物安全以及生產成本息息相關,對于重組蛋白藥物(包括單抗)的非均一性分析變得越來越被重視。
            采用具有適度疏水性的填料,以含鹽水溶液作流動相,借助于溶質與固定相間的疏水相互作用實現分離的色譜方法。其保留機理與反相色譜基本相同,所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相強,多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色譜主要用于蛋白質的分離與純化。
            使用丁基疏水色譜柱時需要注意的事項:
            1、樣品準備:確保樣品溶解在適當的溶劑中,并進行充分的混勻。避免樣品中存在雜質或固體顆粒,以防堵塞柱子。
            2、柱子條件:選擇適當的柱子尺寸和填料粒徑來滿足所需的分離效果。通常,較小的填料粒徑可以提供更好的分離效果,但也會增加柱子背壓。
            3、流動相選擇:丁基疏水色譜柱需要使用有機溶劑作為流動相的一部分。常見的有機溶劑包括甲醇、乙醇、乙腈等。根據待分離化合物的性質選擇適當的流動相組合。
            4、溫度控制:某些情況下,溫度對于改善分離效果非常重要??梢酝ㄟ^升高或降低溫度來調整選擇性和峰形。
            5、柱子保護:在使用丁基疏水色譜柱時,建議在樣品進樣之前使用保護柱。保護柱通常是與分離柱相同的填料材料,但長度較短。它可以防止樣品中的雜質堵塞和損壞分離柱。
            6、流速控制:選擇合適的流速以獲得理想的分離效果。過高的流速可能導致峰形變寬或峰形畸變。
            7、柱子維護:定期進行柱子的維護和清洗操作,以確保其性能和壽命。遵循制造商提供的指南和推薦。
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